تاثیر ماده محرک BTH بر بیان ژن PR2 و شدت بیماری آتشک در درخت به

نویسندگان

چکیده

استفاده از مواد محرک جهت القا ژن‌های دفاعی گیاه یکی از روش‌های مبارزه با بیماری‌ها است. این تحقیق با هدف بررسی اثر ماده محرک BTH بر بیان ژن PR2 و شدت بیماری آتشک در گیاه به و در شرایط باغی انجام شد. درختچه‌های دو ساله به ارقام اصفهان و ترش در اردیبهشت ماه با محلول BTH با غلظت‌های 300 و400 میلی‌گرم در لیتر دوبار به فاصله چهار روز محلول‌پاشی شدند، سپس با سوسپانسیون سلولی باکتری عامل بیماری آتشک آلوده شده و چهار هفته بعد شدت بیماری اندازه‌گیری شد. از برگ درختان تیمار شده با BTH 400 میلی‌گرم در لیتر و شاهد (اسپری شده با آب مقطر) نمونه‌برداری انجام شد. پس از استخراج RNA و ساخت cDNA، بخشی از ژن PR2 با استفاده از آغازگر‌های عمومی تکثیر و توالی آن تعیین شد. مقایسه توالی آن با سایر توالی‌های موجود در پایگاه داده‌های DNA نشان داد که تشابه بالایی با ژن‌های شناخته شده گلوکاناز در گیاهان دیگر و از جمله سیب دارد. با طراحی آغازگرهای اختصاصی بر پایه توالی این ژن میزان تغییرات بیان آن از طریق واکنشreal- time PCR ارزیابی شد. نتایج نشان داد که بیان ژن PR2 پس از تیمار گیاه با BTH چندین برابر افزایش یافت. بررسی شدت آتشک نیز مبین 66/21% و 76/13% کاهش شدت آتشک به ترتیب در تیمارهای 400 میلی‌گرم در لیتر و 300 میلی‌گرم در لیتر BTH بود. این نتایج نشان می‌دهد کاهش شدت بیماری آتشک پس از ماده محرک BTH می‌تواند با القا بیان ژن‌های رمز کننده PR پروتئین‌ها و از جمله PR2 مرتبط باشد و از این ماده می‌توان در برنامه مبارزه تلفیقی با بیماری آتشک استفاده کرد.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Effect of the BTH Chemical Elicitor on Expression of the PR2 Gene and Fire blight Disease Severity in Quince

نویسندگان [English]

  • N. Sarhangi
  • A. M. Shakib
  • M. Keshavarzi
  • M. A. Ebrahimi
  • M. Ahmadraji
چکیده [English]

Application of elicitors for inducing plant defense genes is one of the methods used for controlling diseases. This research was carried out for evaluation of effects of the BTH elicitor on the PR2 gene expression and fire blight severity in quince. Two year- old quince plants of Isfahan and Torsh cultivars were treated with BTH at 400 mgl-1 twice at a four day interval. The treated trees were then infected with bacterium suspension and the disease severity was assessed after four weeks. Leaf samples were taken before inoculation and after extraction of RNA and synthesis of cDNA, a part of the PR2 gene was amplified with the degenerate primers and it was sequenced. Alignment of the sequence with other sequences in the data base showed high similarity with glucanases from other plants including apple. Specific primers were designed according to the sequence and expression of the PR2 gene was evaluated by real time PCR. The results showed that expression of the PR2 gene was increased several times after treatment of plants with BTH. Evaluation of the disease severity also showed % 21.66 and %13.76 decrease in plants treated with 400 and 300 mgl-1 BTH, respectively. These results show that decreasing the fire blight severity after treatment with the BTH elicitor could be related to induction of genes encoding PR proteins including PR2 and this material can be used in the integrated fire blight disease management program.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Quince
  • fire blight
  • PR proteins
  • Gene expression
  • real time PCR